细胞核融合实验图:
(图1)
图1 核移植的protocol
(a) 持有含有卵周间隙的 GV(germinal vesicle生殖泡阶段) 卵母细胞。
(b) 将切割刀插入卵周间隙。
(c) 仅切掉透明带而不破坏卵膜。
(d) 因此,GV 卵母细胞呈现出狭缝(箭头所示)。
(e) 通过狭缝将去核移液器插入卵母细胞,并将其操纵到 GV 附近。
(f) 将 GV 吸入去核移液器并
(g) 缓慢抽出移液器。
(h) 得到去核 GV 卵母细胞。
(i) 通过抽吸将数个卵母细胞吸入移液管中
(j) 接下来,吸取少量灭活的 HVJ 溶液(MeltonVEC™-Cell Fusion Kit。)
(k) 持有去核 GV 卵母细胞。
(l,m) 将 non-growing-卵母细胞植入去核受体 GV 卵母细胞。(non-growing-卵母细胞之前经过MeltonVEC™-Cell Fusion Kit溶液的浸泡处理)
(n) 去核受体 GV 卵母细胞与 ng(non-growing) 卵母细胞的孵育在MeltonVEC™-Cell Fusion Kit溶液中(箭头)。(ng卵母来源于新生小鼠(newborn mice),
(o) 确认细胞融合并培养重建的卵母细胞。
(p) in vitro maturation (IVM)体外成熟后,重建的卵母细胞在 MII 处停滞(箭头;第一极体)。
来源:Nat Protoc. 2008;3(2):197-209. doi: 10.1038/nprot.2007.531.
(图片由上海中科院刘星辰博士测试提供)
商品名称 | 货号 | 单位规格 | 数量 |
MeltonVEC™-Cell Fusion Kit | MSV-1002 MSV-1002-4 |
260ul/支 | 1支/盒(MSV-10021) 4支/盒 (MSV-10024) |